體內哺乳動物骨髓細胞染色體畸變試驗儀體內哺乳動物骨髓細胞染色體畸變試驗儀

一、儀器介紹

實驗目的：

檢測受試物是否引起哺乳動物骨髓細胞染色體畸變,以評價受試物致突變的可能性

實驗概述：

染色體是細胞核中具有特殊結構和遺傳功能的小體,當化學物質作用于細胞周期G1期和S期時誘發(fā)染色體型畸變,而作用于G2期時則誘發(fā)染色單體型畸變。給試驗的大、小鼠腹腔注入秋水仙素抑制細胞分裂時紡錘絲的形成,以增加中期分裂相細胞的比例,并使染色體絲縮短、分散、輪廓清晰。在顯微鏡下觀察染色體數(shù)目和形態(tài)。本方法特別適用于需考慮體內代謝活化后的染色體畸變分析。若有證據(jù)表明受試物或其代謝產物不能到達骨髓,則不適用于本方法，

應用范圍

應用于科研、農業(yè)、衛(wèi)生、教育、霧霾狀態(tài)可吸入顆粒染毒效果研究等各個領域

符合標準：

GB/T 15670.16-2017《農藥登記毒理學試驗方法第16部分:體內哺乳動物骨髓細胞染色體畸變試驗》

二、試驗流程

1）動物選擇:常用嚙齒類動物（大鼠或小鼠），通常每組至少5只/性別。

2）給藥方案:

單次給藥:通常在采樣前12-48小時給藥（覆蓋細胞周期）

多次給藥:若受試物代謝或毒性需重復暴露。

3.陽性對照:已知致畸變劑（如環(huán)磷酰胺）

4.陰性對照:溶劑對照（如生理鹽水或DMSO）

5.采樣時間:通常在給藥后24小時和48小時采集骨髓細胞（覆蓋不同細胞周期階段）

6.染色體制備:

處死動物后取出骨髓細胞。

用秋水仙素（Colchicine）處理，阻斷細胞分裂于中期。低滲處理、固定、制片并染色（如Giemsa染色）

7.鏡檢分析:

觀察至少200個中期分裂相/動物，記錄畸變類型和頻率，

區(qū)分染色體型畸變（如雙著絲粒體）和染色單體型畸變（如斷裂）

三、結果判定

1）劑量相關性:畸變率隨劑量增加而升高。

2）統(tǒng)計學差異:試驗組畸變率顯著高于陰性對照組(如p<0.05)

3）生物學意義:需結合歷史對照數(shù)據(jù)和畸變類型綜合評估。